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技術(shù)文章
2020-69
白細(xì)胞介素10(IL-10),也被稱為人類細(xì)胞因子合成抑制因子(CSIF),是一種抗炎細(xì)胞因子。在人類中,白細(xì)胞介素10是由IL10基因編碼的。IL-10信號(hào)通過(guò)兩個(gè)IL10同源二聚體與一個(gè)由兩個(gè)IL-10受體-1和兩個(gè)IL-10受體-2蛋白組成的異源四聚體受體復(fù)合物傳遞。下游通過(guò)JAK1和Tyk2分別磷酸化IL-10受體1+IL-10受體2的胞質(zhì)尾端來(lái)誘導(dǎo)STAT3信號(hào)傳遞。IL10通過(guò)活化的巨噬細(xì)胞來(lái)抑制炎癥因子如TNF、IL-6、IL-1的表達(dá)。IL-10是一種具有重要...
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2020-65
在培養(yǎng)細(xì)胞的過(guò)程中,你是否遇到:本應(yīng)貼壁的細(xì)胞,某次傳代后出現(xiàn)不貼壁了?細(xì)胞養(yǎng)不起來(lái),生長(zhǎng)速度緩慢,或突然停滯生長(zhǎng)?細(xì)胞狀態(tài)不好,視野中總是存在較多死細(xì)胞?想要知道如何才能把細(xì)胞養(yǎng)好,我們需要先明確培養(yǎng)細(xì)胞的3個(gè)關(guān)鍵要素:良好的細(xì)胞來(lái)源,嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膶?shí)驗(yàn)操作,正確的培養(yǎng)體系。關(guān)于操作,其中存在許多人為不可控因素,我們后期會(huì)另辟專題討論,今天重點(diǎn)聊下如何正確選擇合適的培養(yǎng)體系。細(xì)胞的培養(yǎng)體系一般指用于培養(yǎng)細(xì)胞的*培養(yǎng)基,它在培養(yǎng)細(xì)胞過(guò)程中主要發(fā)揮4大功能:提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、維持細(xì)胞穩(wěn)態(tài)、...
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2020-62
Hyclone胎牛血清使用方法:在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,經(jīng)常加入5%-20%的Hyclone胎牛血清澳洲,常使用的Hyclone澳洲胎牛血清濃度是10%。高濃度的血清可能改變細(xì)胞的基因表達(dá)譜,影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果,我們?cè)趯?shí)驗(yàn)中使用10%的Hyclone澳洲胎牛血清培養(yǎng)293T細(xì)胞,效果非常好。但是有些細(xì)胞也會(huì)使用5%的HycloneFBS或者20%的Hyclone胎牛血清,要根據(jù)具體細(xì)胞選擇合適的胎牛血清濃度。HyClone胎牛血清保存方法:(1)長(zhǎng)期保存的血清必須儲(chǔ)存于-20℃-7...
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2020-525
01、血清的顏色如何?為何有的胎牛血清顏色偏紅,而有的偏黃?是因?yàn)樘ヅQ孱伾怯裳t蛋白(鮮紅)和膽紅素(黃)決定的,主要是受血紅蛋白影響。血紅蛋白含量很低時(shí),含少量膽紅素,呈淡黃或金黃。血紅蛋白含量高時(shí),會(huì)呈現(xiàn)淡紅色。需要長(zhǎng)期保存的血清必須儲(chǔ)存于-20℃冰箱(未開(kāi)封血清有效期為5年)。若存放于4℃,請(qǐng)勿超過(guò)1個(gè)月,若一次無(wú)法用完一瓶,建議將血清無(wú)菌分裝并冷凍。02、血清如何解凍,使用前是否需要過(guò)濾?血清解凍需采用逐步解凍法:將血清從-20℃冰箱放入4℃冰箱中溶解一天,然后...
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2020-519
人源細(xì)胞系作為體外模型而被廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)研究。正確數(shù)據(jù)的獲得常依賴于細(xì)胞系的特性,尤其是當(dāng)它用來(lái)替代其來(lái)源者的組織時(shí)。人源細(xì)胞系常規(guī)培養(yǎng)傳代流程:(1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次,加2-3ml0.25%胰酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通??刂圃?-2min)(2)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項(xiàng)操作或者凍存(3)取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)?培養(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中...
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